Obtención de un marcador leucocitario anti-CD45 para citometría de flujo

Autores/as

  • Grisel Rabell Velázquez Laboratorio de Anticuerpos y Biomodelos Experimentales (LABEX). Santiago de Cuba. Cuba
  • Suyén Rodriguez Pérez Laboratorio de Anticuerpos y Biomodelos Experimentales (LABEX). Santiago de Cuba. Cuba
  • Jeorge Fernández Duarte Laboratorio de Anticuerpos y Biomodelos Experimentales (LABEX). Santiago de Cuba. Cuba
  • Yanet Rivero Fernández Laboratorio de Anticuerpos y Biomodelos Experimentales (LABEX). Santiago de Cuba. Cuba
  • Katya Ramirez Tur Laboratorio de Anticuerpos y Biomodelos Experimentales (LABEX). Santiago de Cuba. Cuba
  • Mercedes Cedeño Arias Centro de Inmunología Molecular. Habana. Cuba
  • Rancés Blanco Santana Centro de Inmunología Molecular. Habana. Cuba
  • Elio Cisneros Prego Laboratorio de Anticuerpos y Biomodelos Experimentales (LABEX). Santiago de Cuba. Cuba
  • Rosa María Pérez Silva Universidad de Oriente. Santiago de Cuba. Cuba

Resumen

El reactivo anti-CD45 conjugado con Isotiocianato de Fluoresceína (FITC) es útil para el diagnóstico y estudio de inmunodeficiencias de células T y B; en este trabajo para su obtención se modificó la relación entre el fluorocromo y el anticuerpo a conjugar mediante tres protocolos, partiendo de la proporción 1:2 recomendada. El anticuerpo fue purificado por cromatografía de afinidad, a una pureza de 99,3 %. Se evaluó la relación FITC/Proteína mediante la lectura del conjugado a 495 nm y 280 nm; y el porciento de reconocimiento leucocitario para citometría de flujo. El producto mostró buena actividad biológica con porcentaje de reconocimiento leucocitario en el rango de 90,7 % - 96,8 %, destacando el P-2 que permite del reactivo a un menor costo de producción, en comparación con el precio del producto importado; quedando establecido el proceso de conjugación para el anti-CD45 con FITC en el Laboratorio de Anticuerpos y Biomodelos Experimentales (LABEX).

Palabras clave: anticuerpo monoclonal, marcador leucocitario, Isotiocianato de Fluoresceína (FITC), citometría de flujo.

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Publicado

2017-06-09

Cómo citar

Rabell Velázquez, G., Rodriguez Pérez, S., Fernández Duarte, J., Rivero Fernández, Y., Ramirez Tur, K., Cedeño Arias, M., Blanco Santana, R., Cisneros Prego, E., & Pérez Silva, R. M. (2017). Obtención de un marcador leucocitario anti-CD45 para citometría de flujo. Revista Cubana De Química, 29(2), 284–302. Recuperado a partir de https://cubanaquimica.uo.edu.cu/index.php/cq/article/view/2512

Número

Sección

Artículos

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