Protocolo de purificación en dos etapas de fosfolipasas A2 a partir de la anémona marina Condylactis gigantea
Resumo
El veneno de los celenterados marinos constituyen mezclas complejas de varios componentes, muchos de naturaleza proteica, y para los cuales se ha descrito la actividad fosfolipásica A2. El objetivo de la presente investigación fue purificar las fosfolipasas A2 (FLA2) procedentes de la anémona marina Condylactis gigantea a partir de un protocolo de dos etapas para su posterior caracterización. Se muestra la purificación de FLA2 en un soporte cromatográfico de afinidad con fosfatidilcolina de huevo inmovilizada covalentemente para la purificación de fosfolipasas A2, a los que se les comprobó cualitativamente la actividad fosfolipásica A2 por cromatografía en placa (TLC) utilizando sustrato marcado con fluorescencia. Dicho soporte cromatográfico permite que en un protocolo de purificación de solamente dos pasos se obtengan tres componentes proteicos de pesos moleculares entre 18000 y 14000, con al menos un componente que posee actividad fosfolipásica A2.
Palabras clave: cromatografía de afinidad, fosfolipasa A2, anémona marina, Condylactis gigantea, purificación de proteínas.
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